72 Std. bei 37° C 72 Std. bei — 8° C
1. Biuretprobe: Deutlich violett. Sehr schwach violett.
2. Milionprobe: Deutlich + Sehr schwach +
3. Sulfosalizylsäure 40%: Schwache Trübung, in beiden Fällen etwa gleich.
4. Phosphorwolframsäure: Starke Flockung. Flockung nicht Vz so stark.
5. Phosphor wolf ramsäure Deutlich kristalliner Kristalliner Nieder schlag
+ n /l Schwefelsäure: Niederschlag. eben angedeutet.
Die Versuchsreihe wurde mehrmals auch mit anderem Drüsenmaterial — wiederholt.
Das Ergebnis änderte sich nicht. In einem Falle glückte es sogar, das F iltra t völlig
klar zu erhalten, so daß die Sulfosalizylsäureprobe negativ ausfiel.
Der An s a t z zum N a c hwe i s d e r d i p e p t i d s p a l t e n d e n Kom p o n e n t e m i t t
e l s „ F e rme n t d i a g n o s t i c um“ (vgl.S. 91) lautete folgendermaßen:
L e i b l e i n -Drüsenmaterial : Aquadest. = 1:30.
L e i b l e i n -Drüsenanreibung : Glycyltryptophan = 1:1 .
24 Stunden Thermostat bei 30° C.
N a c h w e i s d e r S p a l t u n g : Tryptophanreaktion mit Bromwasser in dem mit 3%’
Essigsäure angesäuerten Ansatz.
Ergebnis: Sofort 24 Stunden bei 30° C
Tryptophanreaktion: Negativ Violettfärbung.
Kont rol le: Enzymmaterial 15 Minuten im Wasserbad bei kochendem Wasser.
Ergebnis: Sofort 24 Stunden bei 30° C
Tryptophanreaktion: Negativ Negativ.
Unter den gegebenen Versuchsbedingungen finden wir also eine p r o t e i n s p a l t
e n d e K o m p o n e n t e , aber ohne eine Wirkung auf Catgut feststellen zu können, und
eine d i p e p t i d s p a l t e n d e K o m p o n e n t e .
Der einwandfreie Nachweis des Vorhandenseins extrazellulärer Enzyme in den verschiedenen
Drüsen ist nicht einfach. Wir sehen dies deutlich an den widersprechenden
Ergebnissen von H i r s c h (1915) und M a n s o u r-B e c k (1934). Ersterer konnte bei M u r e x
tr u n c u lu s k e i n e eiweißspaltenden Enzymkomponenten in der Le i b lein-Drüse feststellen,
während letztere in der großen Vorderdarmdrüse = Le i b l ein-Drüse von M u r e x
a n g u life r u s Lamk. eine verhältnismäßig stark wirkende Proteinase (Substrat = Kasein),
eine Carboxypolypeptidase, eine Aminopolypeptidase und eine Dipeptidase fand. Autolyse
ließ sich nicht nachweisen.
Völlig negativ fiel die Untersuchung auf eine f e t t s p a l t e n d e K om p o n e n t e im
L e i b 1 e i n - Drüsenmaterial aus. Die Versuchsanordnung war genau die gleiche, wie sie
auf S. 106 für das Mitteldarmdrüsenmaterial besprochen wurde.
Da H irsch (1915, S. 423) auf Grund seiner Versuche zu der Schlußfolgerung kommt,
daß die Le i bl e in-Drüs e von Murex trunculus der Hauptort der Amylasesekretion sei,
erwartete ich zunächst auch bei Buccinum undatum L. mehr oder weniger starke k o h l e h
y d r a t s p a l t e n d e K om p o n e n t e n in dieser Drüse anzutreffen. Genau das Gegenteil
tra t ein!
Alle q u a l i t a t i v e n V o r v e r s u c h e fielen negativ aus. Sie sollen hier nicht geschildert
werden. Trotzdem wurde eine q u a n t i t a t i v e Prüfungsart mit der Schoorl-
Methode an einem Glyzerinextrakt (1:20) mit Phosphatpuffern pH = 5,9 durchgeführt.
Alle Werte des Ansatzes lauteten wie die auf S. 108 für Mitteldarmdrüsenmaterial angegebenen.
Das Ergebnis war, daß weder nach 21/& noch nach 21 oder 47 Stunden irgendwelche
Änderung der Titrationswerte beobachtet werden konnte.
Die nach H agedorn und J ensens Methode durchgeführten Mikrobestimmungen (vgl.
Tabelle XVII) zeigen nur nach 3 Stunden bei pH 6,97 und pH 6,45 einen ganz unbedeutenden
Zuwachs (vgl. hierzu die Bemerkungen auf S. 116). Dieser fällt aber gegenüber
demjenigen der Mitteldarmdrüsen (vgl. Tabelle XV) nicht ins Gewicht, denn er ist nach
24 Stunden völlig verschwunden. Alle anderen Werte liegen innerhalb der Fehlergrenzen
der Methode. Infolge des Materialmangels konnten die Untersuchungen leider nicht weiter
ins alkalische Gebiet vorgetrieben werden. Unter biologischen Verhältnissen dürften
höhere pH-Werte aber kaum in Frage kommen.
T a b e l l e XVI I .
L e i b l e i n - D r ü s e : S t ä r k e - A b b a u .
Materialansatz: 1,5 g L e i b l e i n -Drüse -(- 45 ccm Puffer.
Substratansatz: 3 ccm 1% lösliche Stärke in 1% NaCl-Lösung.
Verdauungsansatz: 3 ccm Materialansatz 4 - 3 ccm Substratansatz.
Antisepticum: —
Verdauungszeit: 3 und 24 Stunden bei 37° G.
Bestimmungsmethode: Hagedorn-Jensen-Mikrozuckerbestimmung.
Titriert mit: n/200 Thiosulfat.
V e r d a u u n g s w i r k u n g .
Nr. Puffergemisch Materialansatz- Zuwachs in mg Glukose
pH-Werte*) 3 Stunden 24 Stunden
II.
IV.
VI. Na-K-Phosphat 6,97 0,014 — 0,001
VII. 6,45 0,011 — 0,006
VIII. 5,97 0,007 — 0,001
IX. K-Biphthalat-HCl 6,19 0,005 — 0,006
X. 5,69 0,003 0,000
Z u s amme n f a s s e n d s t e l l e n wi r fest , d a ß d i e v o r d e r s t e M i t t e l d a r m drüs
e , di e L e i b l e i n - D r ü s e , e i ne V e r d a u u n g s d r ü s e ist , w el c h e e iw e i ß s
p a l t e n d e Komp o n e n t e n a u f w e i s t . Es g e l a n g e i n e Z e r l e g u n g von Mu s k
e l e i w e i ß u n d e i ne G l y c y l t r y p t o p h a n s p a l t u n g . E i n e V e r f l ü s s i g u n g
v on C a t g u t f a n d n i c h t s t a t t . E b e n s ow e n i g w a r da s D r ü s e n m a t e r i a l in
d e r Lage , u n t e r de n g e s c h i l d e r t e n V e r h ä l t n i s s e n l ö s l i c h e S t ä r k e
o d e r O l i v e n ö l zu s p a l t e n .
y) Wirkungen des Vorderdarmdrüsenmaterials.
Die wenigen bisher über die enzymatische Wirkungsweise der „Speicheldrüsen“ von
Buccinum undatum L. vorliegenden Angaben lassen keine Schlüsse auf ihre biologische
Bedeutung im Plane des Verdauungsfeldes zu. So gibt Dakin (1912, S. 38) an, daß nach
Griff ith in ihnen eine Amylase vorkomme, die Stärke in Glukose auf spalte. Nach
Mansour-Beck (1934, S. 384) enthalten sie eine sehr schwache Proteinase (0,04 Enzym-
*) Die Verdauungsansatz-pH-Werte konnten infolge zu geringer Flüssigkeitsmengen nicht bestimmt werden.