z u s i im m en b r a ch te , o h n e je d o c h ein R e s u l t a t zu e rz ie len . D ie nun e r fo
lg t e L e k t ü r e d e r B e r n a r d s c h e n S c h r i f t b e s t ä t ig t e d ie E c h th e i t
d e r i so l ie r ten P i lz e u n d nun g e l a n g e n S y n th e s e n m i t S am e n t ro p
i s c h e r O r ch id e en .
D am i t w a r d e r A n l a ß zu w e i t e r e n S tu d ie n g e g e b e n , d e r en
w i s s e n s c h a f t l ic h e r T e i l b e r e i t s v e rö f fe n t l ic h t ist^), ü b e r d e r en p r a k t
i s ch e B e d e u t u n g im fo lg e n d e n b e r ic h t e t w e rd e n so ll. D e r D a r s
t e l lu n g d e r im e in z e ln en e rz ie lten E r f o l g e v o r a u s g e h e n so ll e in e g e n
a u e S c h i ld e r u n g d e r se i t J a h r e n e rp r o b t e n M e th o d ik .
a ) M e th o d ik .
I. T ) ic I s o l i e r u n g d e r W u r z e l p i l z e .
Z u r I s o l i e r u n g u n s e r e r P i lz e b e d ü r f e n w i r z u n ä c h s t e in e s N ä h r b
od ens , a u f d em die P i lz e w om ö g l i c h a l le g u t g e d e ih e n . G le ic h z e i t ig
v e r l a n g t m an v o n e in em so lch en B o d e n , d aß die F r em d in fe k t io u e n ,
d ie man le ich t e rh ä l t , m ö g l i c h s t we n i g gut w a c h s e n , d am i t die R e i n g
e w in n u n g d e s P i lz e s k e in e S c h w i e r i g k e i t m a ch t - ) . A l s A u s g a n g s p
u n k t fü r a lle N ä h rb ö d e n d ien t u ns e in e m in e r a l i s c h e N ä h r lö s u n g ,
d ie a l le fü r d en P i lz (und a u ch d ie P f la n z e ) n o tw e n d ig e n M in e r tü s a lz e
en thä lt . O b g le ic h s ich im g e g e b e n e n F a l l e w o h l n o ch e in e g e e i g n
e te r e a u sp ro b ie r e n läßt , h a b e ich s te t s d ie s t i c k s t o f f r e ie m in e r a l i s c h e
N ä h r lö s u n g n a ch A . M e y e r v e rw a n d t^ ) .
S i e h a t fo lg e n d e Z u s am m e n s e t z u n g :
I g K H 2 P O 4 (M o n o k a l ium p h o sp h a t ) ,
0 , 1 g CaClg (C h lo rk a lz ium ) ,
0 ,1 g N a C l (C h lo rn a t r ium ) ,
0,3 g M g SO ^ -j- 7 H gO (M a g n e s ium su l f a t ) ,
0 ,0 1 g FeaClß (E i s e n ch lo r id ) ,
10 0 0 g d e s t i l l ie r te s W a s s e r (o d e r r e in e s R e g e n w a s s e r , d a s
s ic h n o ch b e s s e r e ig n e t ) .
A l s S t i c k s t o f fq u e l le fü g e n w i r zu:
0,5 g NIT4CI (Am m o n ium c h lo r id ) .
W i r b e z e ic h n e n d a s E r h a l t e n e mit M • N - h N - L ö s u n g . D ie
1) B u r g e f f , H., Die Wurzelpilze der Orchideen, Jena 1909.
2) Wie B e r n a r d hatte ich in der ersten Zeit zur Isolierung und Kultur der Pilze
eine Abkochung von Salep (getrocknete und zerriebene Knollen mittel- und südeuropäischer
Ophrydeenarten) verwandt. Diese dem Agar zugegebene Masse ist wahrscheinlich wegen
ihres hohen Gehaltes an Eiweiß, d. i. organisch gebundener Stickstoff, sehr wenig geeignet.
In vielen Fällen wird der aus dem Wurzelstück auswachsende Pilz von den allzu üppig
wuchernden Bakterien erdrückt werden.
3) Vgl. A . M e y e r , Praktikum der botanischen Bakterienkunde, Jena 1903. tv’
M . N N - l . ö s u n g k a n n l ä n g e r e Z e i t a u fb ew a h r t w e rd e n u n d e rh ä l t ,
j e n a c h ih r e r V e rw e n d u n g , v e r s c h ie d e n e Z u s ä tz e .
U m e in en I s o l i e r u n g s b o d e n zu e rh a l ten , se tz en w i r zu l o o o c cm
d e r N ä h r lö s u n g 1 ,5 g A g a r - A g a r u n d la s s e n d a s G a n z e e in en T a g
ü b e r s teh en , b i s d e r A g e i r g e n ü g e n d W a s s e r a u fg e n om m e n hat. D a n n
e rh i tz en w i r d ie S a c h e zum K o c h e n u n d g e b e n , w en n s ich d e r A g a r
g e lö s t hat, n o ch e in e S p u r in k a l t em W a s s e r a u fg e s c h w em m t e r S t ä r k e
(R e i s s t ä r k e , K a r t o f f e lm e h l u sw.) u n t e r U m r ü h r e n hinzu. D a n n n e u t
r a l i s ie r t man d ie L ö s u n g mit N a t r ium k a r b o n a t b is s ie n u r n o ch
s c h w a c h a u f b lau en L a c k m u s r e a g ie r t . N a c h d em s ie n o ch e tw a e ine
S t u n d e a u f d em F e u e r g e b l ie b e n ist, w i rd h e iß d u r ch W a t t e f i l t r ie r t i).
D a s f e r t ig e S u b s t r a t w i r d in k le in e r e n P o r t io n e n zu e tw a 5 0— 100 c cm
in e n t s p r e c h e n d g rö ß e r e , h ö c h s t e n s h a lb a n g e fü l l t e E r l e nm a y e r k o lb e n
g e g o s s e n , d ie s e m i t W a t t e v e r s c h lo s s e n u n d an zw e i o d e r d re i fo l g
e n d e n T a g e n je Y 2— V i S tu n d e n b e i loo*^ s te r ilis ie r t .
D e r N ä h r b o d e n w i rd d an n v o r G e b r a u c h e rw ä rm t u n d f lü s s ig
in s t e r i le P e t r i s c h a le n in n ich t zu d ü n n e r S c h ic h t ^ lu sg e g o s sen . N a c h
d em E r k a l t e n s ind d ie D e c k e l d e r S c h a l e n g u t zu t ro c k n e n ‘■^). S in d
e in e A n z a h l P e t r i s c h a le n mit t r o c k e n e r A g a r o b e r f l ä c h e p r ä p i i r ie r t , so
k a n n mit d e r I s o l i e r u n g d e r P i lz e b e g o n n e n w e rd en .
D i e W a h l d e r W u r z e ln w i rd b e e in f lu ß t d u r c h die N o tw e n d i g k
e i t s te t s f r i s c h v e rp i lz t e W u r z e l s t e l le n zu r I s o l i e r u n g zu v e rw e n d e n .
B e i E r d o r c h id e e n w a c h s e n d ie W u r z e ln m e i s t l ä n g e r e Z e i t fo r t ; die
V e r p i l z u n g is t s e h r r e g e lm ä ß ig . M a n b r a u c h t m e i s t b loß S t ü c k e in
k ü r z e r em A b s t a n d vo n d e r W u r z e l s p i t z e zu n ehm en , um f r i s c h v e rp i lz t e
1) Soll das Substrat etwa zu Demonstrationskulturen absolut blank sein, so kann man
noch durch Papier filtrieren, verwende aber statt der gewöhnlichen Stärke sogenannte lösliche
Stärke (Amylum solubile), wie es die Fabriken chemischer Reagentien liefern.
2) Wenn der ausgegossene Agar erkaltet ist, beschlägt sich der Deckel der Petrischale
mit Kondenswasser; um dies zu entfernen, hebt man den Deckel bei umgekehrter Schale
ab und stellt diese auf eine sterile (abgeflammte) Glasplatte. Der Deckel wird nun
sorgfältig trocken gerieben, gut abgeflammt und rasch auf die wieder aufgehobene Schale
aufgesetzt.